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顯微鏡的相片是利用入射電子束與它作用后的透射電子作為信號,依靠數碼顯微鏡將其聚焦成像,并經多級放大,后在熒光顯微鏡或照相底片上給出所要的圖象。
在使用奧林巴斯顯微鏡拍照時,首先要根據使用者要求,調整適當的放大倍數。在物鏡的辨別中,以往只根據物鏡上所標的數字去辨認。作者總結出更簡單的辨認方法:一是從物鏡的長短辨別,長者為高倍,短者為低倍。二是根據顏色標記上辨認,帶有黃周的為低倍10x,帶有綠周的為低倍20 x,帶有藍圈的為高倍40,帶有白圈的為更高倍100x。按照這兩種方法去辨認物鏡的放大倍數,簡便易行,明顯地縮短了選用所需物鏡的時間。
奧林巴斯顯微鏡攝影拍照有以下五個程序,請廣大用戶需要注意:
1、光源接通,顯微鏡開關只“開”狀態,電壓調節在3~5伏;
2、相差顯微鏡與環狀光闌相匹配(即10倍相差物鏡與10倍環狀光闌配用);
3、標本置載物臺上,用10倍目鏡調焦后,將攝影標記部位移入取景框中心位置;
4、輕輕旋轉觀察器刻度端的視度補償環,取景框內雙十字線清晰,調焦使標本清晰,再次用眼環視一下雙十字線與圖像,兩者同時清晰時即可曝光;
5、實驗完畢,電壓下降至零位,關閉電源。
需要特別注意:
1、高數值孔徑的物鏡和低數值照相目鏡組合可以提高物像反差;
2、相差顯微鏡可以用于活體材料和固定材料的研究。標本材料厚度應小于20微米,載玻片厚度在1毫米左右,若玻片過厚,亮環與相板的圓環不能合軸。
3、聚焦問題
轉動粗調手輪,使載物臺降至低位置,將標本放在載物臺上,用標本片夾固定。把10x物鏡切入光路對樣品聚焦,將聚光鏡升至高位置??s小視場光闌,在視場中可見邊緣模糊的視場光闌圖像,微降聚光鏡,至視場光闌的圖像清晰聚焦為止。用聚光鏡兩個調中的螺桿把縮小的視場光闌圖像調至視場中心,開放視場光闌直到光闌圖像周邊與視場邊緣相接。
4、物鏡與玻片距離
掌握好不同放大倍數的物鏡與玻片的大致距離很重要。在使用10x物鏡時,物距在1cm 左右。在使用高倍物鏡時,其物距的臨界值在1mm左右,在臨界值附近密切注視顯微鏡內視野變化,從而提高找到清晰物像的速度。
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